蒺藜苜蓿microRNA-SSR分子標記引物及在苜蓿品種鑒定中的應用

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及蒺藜苜蓿microRNA-SSR分子標記引物及在苜蓿品種鑒定中的應用。

背景技術(shù)

根據我國《植物新品種保護條例》規定：植物新品種必須具備特異性、一致性和穩定性(簡(jiǎn)稱(chēng)DUS)，才能授予植物新品種權。DUS測試技術(shù)體系包括以植物農藝學(xué)形態(tài)特征測試為主導的傳統測試技術(shù)和對基因型測試的分子輔助技術(shù)兩部分。隨著(zhù)我國植物育種和種子貿易的發(fā)展，對植物新品種的保護及育種家權益的保障的重要性日益凸顯。

苜蓿是全球種植面積最大的豆科牧草，具有廣泛的生態(tài)適應性、穩定的生產(chǎn)力及較高的營(yíng)養價(jià)值，具有“牧草之王”的稱(chēng)號，在我國農牧業(yè)生產(chǎn)和生態(tài)經(jīng)濟建設中發(fā)揮著(zhù)巨大作用。近年來(lái)，隨著(zhù)畜牧業(yè)的快速發(fā)展，我國在苜蓿品種培育和審定工作方面也取得了重要進(jìn)展。目前，苜蓿新品種的審定和品種真實(shí)性的鑒定方法主要是通過(guò)田間種植，根據其形態(tài)學(xué)特征進(jìn)行鑒別。但這種方法費時(shí)費力、容易受環(huán)境和主觀(guān)因素的影響。另外，由于苜蓿骨干親本的集中使用，從而導致育成品種間性狀差異日趨狹窄，使得通過(guò)形態(tài)學(xué)特征進(jìn)行品種鑒定變得更加困難。因此，建立一套快速、精確、廉價(jià)的苜蓿品種鑒定技術(shù)，顯得非常必要。

近年來(lái)，以PCR技術(shù)為基礎的分子標記技術(shù)，如RAPD、SCAR、SSR、ILP等，已經(jīng)被廣泛用于植物品種鑒定。MicroRNA(miRNA)是生物體內普遍存在的非編碼、長(cháng)度約16～29nt的小分子RNA，在轉錄后水平通過(guò)介導靶mRNA降解或翻譯抑制調控基因表達，從而作為一類(lèi)重要調控因子參與植物整個(gè)生長(cháng)發(fā)育進(jìn)程調控。根據miRNA序列開(kāi)發(fā)出的microRNA-SSR(miRNA-SSR)分子標記較之其它類(lèi)型的分子標記具有功能相關(guān)性、基因組分布廣泛、多態(tài)性豐富、重現性強以及廣泛的通用性等特點(diǎn)，可用于品種鑒定、系統發(fā)育分析、遺傳多樣性分析以及遺傳連鎖作圖等方面。作為一種新型的分子標記，迄今為止，miRNA-SSR標記主要在模式植物水稻中得到開(kāi)發(fā)和應用，但在非模式植物苜蓿中，miRNA-SSR引物的開(kāi)發(fā)以及在品種鑒定中的應用尚未見(jiàn)報道。因此，在全基因組水平開(kāi)發(fā)蒺藜苜蓿miRNA-SSR分子標記并研究其在其近緣種苜蓿鑒定中的應用，對苜蓿品種進(jìn)行高效、快速的鑒定以及進(jìn)行分子標記輔助育種具有重要意義。

發(fā)明內容

為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：

蒺藜苜蓿miRNA-SSR分子標記引物，所述分子標記引物包括如實(shí)施例所述10對。

蒺藜苜蓿miRNA-SSR分子標記引物在苜蓿品種鑒定中的應用。

技術(shù)負責人： 劉文獻 草地農業(yè)科技學(xué)院