NGF基因作為綿羊產(chǎn)羔性狀的分子標記及其應用

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于綿羊分子標記篩選與應用技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及NGF基因作為綿羊產(chǎn)羔性狀的分子標記及其應用。本發(fā)明的分子標記克隆自NGF基因。

背景技術(shù)

種羊的選育是現代化羊場(chǎng)育種和種羊生產(chǎn)工作中的關(guān)鍵環(huán)節。在影響家畜生產(chǎn)效益的幾大科技因素中，遺傳育種與繁殖的科技貢獻率占50％，因此提高羊群繁殖力有助于提高生產(chǎn)效益。第一，在舍飼養羊的成本中，母羊飼養成本占飼養總成本的60％以上，提高母羊的繁殖性能能顯著(zhù)提高生產(chǎn)者經(jīng)濟效益。第二，通過(guò)種羊的選育，增加種羊淘汰率，降低飼養成本。第三，在規?；?、集約化養殖場(chǎng)由于遺傳因素、飼養管理水平等因素引起母羊屢配不孕、產(chǎn)弱羔、死羔等繁殖問(wèn)題凸顯，導致羊群年繁殖效率降低。傳統育種方法中，對家畜性狀選擇的方法多依賴(lài)于家畜的表型，這種方法在大家畜選育中需要豐富的經(jīng)驗和長(cháng)達幾十年時(shí)間。此外，對于一些特殊性狀，如母羊的產(chǎn)羔數性狀，該性狀屬于微效多基因控制的低遺傳力的數量性狀，且受到不同環(huán)境和飼養條件的影響，常規育種方法遺傳改良進(jìn)展緩慢。隨著(zhù)分子標記技術(shù)的發(fā)展和完善，利用與綿羊產(chǎn)羔數性狀緊密連鎖的分子遺傳標記，對產(chǎn)羔數性狀進(jìn)行跟蹤性選擇，減少育種過(guò)程中選擇的盲目性，進(jìn)行早期選育，極大提高育種效率。

神經(jīng)生長(cháng)因子(Neuron Growth Factor，NGF)是神經(jīng)營(yíng)養因子家族中的重要成員之一。NGF與其高親和力受體TrKA結合，誘導TrKA酪氨酸殘基磷酸化，通過(guò)激活磷脂酶Cγ(PLCγ)、磷脂酶肌醇激酶(PI3K)以及銜接蛋白(Shc)信號通路，調控中樞神經(jīng)系統和外周神經(jīng)系統中膽堿能神經(jīng)元的分化和發(fā)育(Counts S等，2005，請在說(shuō)明書(shū)末尾注明完整的參考文獻信息)。近年來(lái)越來(lái)越多的研究發(fā)現，NGF在大鼠、小鼠、金倉鼠、牛、綿羊、山羊、豬、猴子等物種卵巢中表達(Ren LQ等，2005)。NGF及其受體在卵泡生長(cháng)發(fā)育、排卵、卵巢激素的合成、配子運輸、精子獲能、受精以及早期的胚胎等方面都有重要的生物學(xué)功能(瞿長(cháng)偉等，2014)，NGF可以促進(jìn)原始卵泡的組裝和腔前卵泡的形成(Dissen GA等，2001)，通過(guò)調控類(lèi)固醇激素合成、PGF合成以及卵泡膜細胞增殖參與排卵過(guò)程(Dissen GA等，2011)。

通過(guò)以上分析，我們可以得出NGF基因參與動(dòng)物繁殖調控過(guò)程，尤其是卵子發(fā)生和卵泡發(fā)育。尋找NGF基因中變異位點(diǎn)，通過(guò)與性狀間的關(guān)聯(lián)分析發(fā)現基因與性狀之間的關(guān)系是研究基因功能的一個(gè)重要手段，也是進(jìn)行標記輔助選擇的基礎。為此，本發(fā)明開(kāi)展了綿羊NGF基因序列克隆和SNP篩查、檢測及與產(chǎn)羔數性狀關(guān)聯(lián)分析。

發(fā)明內容

本發(fā)明的目的在于克服現有技術(shù)的缺陷，提供一種提高綿羊產(chǎn)羔數的分子輔助選育標記，通過(guò)尋找NGF基因的SNP位點(diǎn)，篩選得到一種一種與綿羊產(chǎn)羔性狀相關(guān)的分子標記，以克服常規育種方法周期長(cháng)、選擇準確性低、無(wú)法進(jìn)行早期選育等技術(shù)缺陷，通過(guò)PCR-RFLP技術(shù)對候選個(gè)體的NGF基因進(jìn)行基因型分析，為綿羊產(chǎn)羔數性狀檢測提供一種輔助選擇的分子標記。

技術(shù)負責人： 李萬(wàn)宏 草地農業(yè)科技學(xué)院